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◆注意事項(xiàng)：
1、標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)作假陽性反響。保存過久可發(fā)作聚合在ELISA中可使本底加深。
2、凍結(jié)標(biāo)本溶解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充沛混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上激烈震動(dòng)。
3、污濁或有沉積的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，弄清后再檢測。
4、重復(fù)凍融會使蛋白效價(jià)降低，所以代測樣本如需保存作屢次檢測，宜少數(shù)分裝冰存。
◆ELISA需要遵從的幾個(gè)細(xì)節(jié)關(guān)鍵：
1.抗原或抗體能吸附于固相載體外表，并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性；
2.抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶銜接構(gòu)成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)參加底物的色彩反響來斷定是否有免疫反響的存在，并且色彩反響的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的色彩反響的深淺繪制規(guī)范曲線并依此計(jì)算出不知道樣品中抗體或抗原的濃度。
除了以上內(nèi)容，在ELISA試劑盒細(xì)節(jié)中，稀釋前、后的樣品有必要充沛混勻，一切試劑在加樣前也須搖勻，以確保試驗(yàn)的均一性。
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