欧美20p I av片在线观看免费 I 国产视频在线播放 I 1024视频在线 I 欧美激情图片小说 I 黑人糟蹋人妻hd中文字幕 I 精品国产18久久久久久 I 中文字幕巨乳 I 亚洲天堂网在线视频 I www成人免费 I 欧美做爰xxxⅹ性欧美大片 I 一边吃奶一边做边爱视频 I 中文字幕人妻熟女在线 I 成人一二三区 I 黑人一级 I 久久精品毛片 I 男人与雌性宠物交啪啪 I 欧美一级片在线免费观看 I 国产精品天美传媒 I 国产做爰免费观看视频 I 免费在线国产视频 I 天天色爽 I 国产天美传媒性色av I 欧美亲嘴 I 放荡的少妇2欧美版 I 久久精品国产精品青草 I 久久精品国产大片免费观看 I 美女被无套爆操 I 91超碰九色在线 I 日韩三级观看 I 亚洲制服丝袜中文字幕在线 I 99视频在线免费看 I 久久久精品午夜 I 亚洲女同精品一区二区 I 日日碰狠狠躁久久躁96 I 丰满人妻熟妇乱又伦精品app I 女乱高潮久久久久久爽爽 I 国产精品萌白酱永久在线观看 I 日韩中文字幕久久久97都市激情

*培養基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巰基乙醇(GIBCO 21985); 1 000 U/ml白血病抑制因子(CHEMICON ESG1107) 
凍存液: 90%胎牛血清或*培養液; 10%二甲基亞砜(DMSO, Sigma D2650) 

一 小鼠胚胎干細胞復蘇 
1. 操作前把培養液在37 ℃水浴中溫熱。 
2. 從液氮中取出一支凍存管的小鼠胚胎干細胞, 放入37 ℃水浴中晃動, 直到只剩下小冰晶。 
3. 吸取凍存管內的細胞懸液加至有少量*培養液的15 ml 離心管中, 1 000 r/min 離心5 min。 
4. 吸棄上清液, 加4~6 ml 培養液, 吹打懸浮。 
5. 重復吹打, 制成單細胞懸液, 盡量避免氣泡。 
6. 轉移到1個已經鋪好飼養層的25 cm2培養瓶中培養。 
7. 每天換液。