做細(xì)胞生物學(xué)試驗(yàn)，細(xì)胞鋪板是比較常見的一個(gè)試驗(yàn)。但是有很多人鋪得不是很均勻，要么中心密周圍稀，要么周圍密中心稀。遇到這些情況該怎么辦呢？接下來就為大家介紹一下在實(shí)驗(yàn)過程中操作細(xì)胞鋪板的技巧。
一般是96孔板，每孔是加100微升細(xì)胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入，加完半邊板后，將未加的細(xì)胞懸液混一下再繼續(xù)加剩下的半邊板子，都加完后蓋上蓋子，左手悄悄扶住板的左邊，右手悄悄敲擊板的右邊緣，留意掌握力度，太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，順次敲擊剩下三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培育箱。
6孔板、12孔板或24孔板，均可采用將個(gè)孔加入少量無血清培育基，晃動(dòng)滋潤整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣辦法滋潤孔底，其它孔一次類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，加細(xì)胞懸液的時(shí)候能夠防止加在中心，中心細(xì)胞多，而加在周邊晃勻后會(huì)出現(xiàn)周邊細(xì)胞多中心少的現(xiàn)象，細(xì)胞渙散較均勻，留意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。細(xì)胞懸液加完后，將細(xì)胞培育板舉高，對(duì)著燈光，從底部往上看，看細(xì)胞有沒有抱團(tuán)。然后從底部敲擊，使之渙散。假如試驗(yàn)室有平板振動(dòng)器的話，建議用這個(gè)儀器稍振動(dòng)一下，作用不錯(cuò)，振幅小，頻率高。
細(xì)胞要盡量打散，大部分呈單個(gè)狀態(tài)。離心后，要充沛懸浮。還有轉(zhuǎn)移到六孔板后，需求晃動(dòng)，晃的時(shí)候不要讓細(xì)胞液轉(zhuǎn)圈，不然細(xì)胞就全被帶到中心去了，就會(huì)不均勻。
一瓶細(xì)胞長滿后，正常處理，在培育瓶里吹勻，然后鋪6孔板，每孔2毫升，鋪完之后不必調(diào)查直接用酒精棉擦拭，然后放到培育箱里，輕微的左右前后各三圈。基本上24小時(shí)之后再調(diào)查，每孔的細(xì)胞都會(huì)很均勻。
計(jì)算好所需求的悉數(shù)液體量和細(xì)胞量，混勻后，加到六孔板里，六孔板按橫8字型晃，顯微鏡下調(diào)查，假如不均勻，按上述辦法再晃。假如細(xì)胞未計(jì)數(shù)直接種的話，在種六孔板的過程中，隨時(shí)晃一下混勻用的瓶子。放在水平板面上先上下移動(dòng)，再左右移動(dòng)，每個(gè)方向5到6次，但搖晃后直接放入培育箱中，不要再做過多的運(yùn)動(dòng)，不然很容易就又聚到中心去了。
上海晶抗生物工程有限公司
地址：上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號(hào)9幢2441室
版權(quán)所有：上海晶抗生物工程有限公司 備案號(hào)：滬ICP備16026504號(hào)-5 總訪問量：699838 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持：智慧城市網(wǎng) 管理登陸
