細胞周期是指從一次細胞分裂形成子細胞開始到下一次細胞分裂形成子細胞為止所經(jīng)歷的過程，可反映細胞增殖的速度。細胞周期由多個階段組成，通常包括G1期(細胞大小增加)、S期(DNA合成和復(fù)制 )、G2期(細胞進一步生長)，以及M期(有絲分裂和細胞分裂)、GO期(細胞靜息休眠)。在細胞周期的不同時期，細胞核內(nèi)的DNA含量存在差異。使用染料對DNA進行染色(如PI染料)，可根據(jù)其熒光強度判斷細胞所處時DNA含量多，熒光強度高，DNA含量少，熒光強度低。
檢測過程中，常遇見可以當(dāng)天檢測的活細胞樣本，以及當(dāng)天無法檢測的活細胞樣本，晶抗自主研發(fā)的細胞周期檢測產(chǎn)品就派上大用處了，既能檢測活細胞又能檢測固定細胞。流式細胞周期檢測中有許多需要注意的事項，制備單細胞懸液：操作應(yīng)輕柔，減少碎片，但消化要充分而不過度，保證細胞不粘連、不破裂，染色要充分；緩慢速度上機檢測：降低CV，避免儀器把相鄰細胞當(dāng)做一個細胞。
排除粘連體：
避免細胞粘黏檢測的DNA含量為非2倍體，導(dǎo)致實驗結(jié)果不準確PI的坐標(biāo)選線性：線性更能體現(xiàn)DNA含量的倍數(shù)關(guān)系；利用RNase消除細胞周期檢測中RNA的影響：PI是一種插入性核酸熒光染料，能選擇性地嵌入核酸DNA雙鏈螺旋的堿基之間并發(fā)出熒光，但也可以插RNA的雙鏈區(qū)，非 DNA特異性，需加入RNase消除RNA的影響；進行DNA染色時不要洗滌：不同于蛋白質(zhì)染料和細胞之間的牢固結(jié)合，DNA與染料的結(jié)合，是一種結(jié)合態(tài)與游離態(tài)之間松散的平衡，洗滌步驟會造成染料丟失，降低核酸的特異性熒光，造成測量值降低；實驗放做：由于PI具有黏性，通常周期實驗放在做，否則需要深度清洗后，再進行其他實驗。
上海晶抗生物具有10幾年流式細胞檢測經(jīng)驗，有絕對專業(yè)的流式技術(shù)平臺和優(yōu)秀的技術(shù)人員，有熒光素種類豐富的流式抗體產(chǎn)品。如果您想咨詢或訂購產(chǎn)品、尋求指導(dǎo)或代測服務(wù)，歡迎聯(lián)系我們！
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