嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值，洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉，避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
動物elisa試劑盒在儲存和溫育時避免強光直接照射，平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
動物elisa試劑盒在保存時也要注意。要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相，然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
血清標本如是以無菌操作分離，則能夠在2～8℃下保存一周，ELISA試劑盒如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的長期保存，應在-70℃以下。標本在保存中如呈現細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時，應離心沉積后取上清檢測。
樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的成長，其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發生分化作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定辦法發生非特異性攪擾。
冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。上海猴ELISA試劑盒標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生損壞作用，然后引起假陰性成果。此外，凍融標本的混勻亦應留意，不要進行劇烈振動，重復倒置混勻即可。
