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小鼠核因子受體活化因子配基ELISA試劑盒實驗的成敗
更新時間:2015-04-15   點擊次數(shù):1927次

更多小鼠ELISA試劑盒
許多試劑檢測都涉及到標準曲線的問題,標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結(jié)果,甚至是關(guān)系到小鼠核因子受體活化因子配基ELISA試劑盒實驗的成敗,那么究竟如何繪制或制作標準曲線呢?
【詳細說明】
小鼠組織因子Elisa試劑盒酶標儀的使用注意事項:
1.樣本名字文件設(shè)定 由于部分試驗的所測樣本不一定是連續(xù),樣本命名顯得尤為重要。同時應(yīng)做到樣本名字文件與吸光度值文件保持一致,這樣若以后再調(diào)出吸光度文件時,樣本名字文件可自動同時調(diào)出;若大批量樣本時應(yīng)對不同微孔板編號區(qū)別(以文件后綴形式)。
2.樣板程序文件設(shè)定 一個實驗室同一試驗可能使用不同廠家試劑盒,但不同試劑盒規(guī)定的設(shè)定對照數(shù)量、閾值判定標準等均可能不一致,酶標儀所設(shè)樣板程序也不一致。為了使用方便,可在樣板程序文件中用后綴加以區(qū)別。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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